试剂盒的运用注意事项和操作程序

发布日期：2020-12-30 09:36:03

一：运用注意事项

1.  试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2. 浓洗刷液也许会有结晶分出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗刷时不影响效果。

3. 严峻按说明书的操作进行，试验效果断定有必要以酶标仪读数为准。

4. 本试剂不一样批号组分不得混用。

5. 封板膜只限一次性运用，以避免交叉污染。

6. 全部样品，洗刷液和各种废弃物都应按感染物处理。

7. 底物请避光保存。

二：操作程序

1. 分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品孔中加入标准品50μl；在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最后稀释度为5倍）。每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。轻轻晃动混匀，37℃温育60分钟。

2. 弃去液体，甩干，每孔加满稀释后洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。如此重复5次，拍干。

3. 每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

4. 取出酶标板，每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

5. 测定：以空白孔调零，在450nm波长下测量各孔的吸光度值（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

6. 根据试剂盒免费代测标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了的，其实际浓度应该乘以总稀释倍数。